microRNA（miRNA）是一类可参与内源性靶基因调节的非编码RNA，长度约为22-28个核苷酸，已有大量研究证实其异常表达可能导致肿瘤的发生，影响其发展和预后。而最近的研究显示，一些具有抑癌基因特性的miRNAs在肿瘤中的异常低表达是由于其编码基因CpG岛甲基化引起的，如miR-335, miR-663, miR-34b/c。在本实验室前期研究中，我们发现在肿瘤组织中miR-218的表达水平明显低于癌旁组织，提示miR-218可能发挥抑癌基因的功能，而这种异常低表达可能受启动子区DNA甲基化的调控。miR-218 编码基因位于 4p15.31 和 5q35.1，分别处于SLIT2和SLIT3的内含子区（http://genome.ucsc.edu/）。通常认为内含子型miRNAs与宿主基因共转录，所以宿主基因启动子区CpG岛的DNA甲基化也会导致这些miRNAs的转录抑制，miR-218-1所处区域未见其它预测转录起始位点，因此预测其与所在宿主基因共用同一个启动子区，共同转录。根据预测，SLIT2启动子区位于Chr 4：20254678-20255227（http://genome.ucsc.edu/，version:GRCh37/hg19），选取此区域来研究miR-218-1的启动子区CpG岛甲基化状态。本次研究通过检测食管癌细胞株（EC9706,EC109）和20对食管癌组织及其相应癌旁组织中miR-218-1基因启动子区的甲基化水平，以及成熟miR-218在肿瘤组织和相应癌旁组织中的差异表达来探讨DNA甲基化对miRNA表达水平的影响，以及与食管癌发病间的联系，以寻找可用于食管癌早期诊断、治疗以及判断预后的分子标志物。方法：提取手术切除的20例食管癌组织及其相应癌旁组织中的总RNA和总DNA，将提取出的DNA进行亚硫酸盐修饰及纯化，再利用巢式甲基化特异PCR（nested methylation-specific PCR）方法检测miR-218-1启动子区的DNA甲基化状态。提取的总RNA利用实时荧光PCR的方法检测20例癌组织和相应癌旁组织中miR-218表达水平。结果：两株食管癌细胞株（EC9706，EC109）表现出了完全甲基化。20例食管癌组织中总体甲基化率为80%（16/20），对应癌旁组织中总体甲基化率为35%（7/20）。两者之间的差异有统计学意义（p<0.05）。而20对食管癌组织样本miR-218的表达水平明显低于其相应癌旁组织（p<0.05）。于此同时甲基化的组织中miR-218的表达水平明显低于未甲基化组织（9.98±1.78VS8.80±1.82，p<0.05）。结论：食管癌中miR-218-1的高甲基化是频发事件，可能是miR-218低表达的重要原因，因而是食管癌的发生、发展的潜在标志物。